Introducción

El manejo de plaguicidas conlleva riesgos para la salud de las personas que los emplean en labores agrícolas, como los agricultores y floricultores (Cervantes et al., 2006). La exposición ocupacional a plaguicidas ocurre por la participación de los trabajadores agrícolas en diferentes etapas del ciclo de utilización del plaguicida, tales como su transporte, almacenamiento, aplicación y manipulación posconsumo (Ministerio de la Protección Social [MPS], 2008a; Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura [FAO], 2014). Como resultado de la exposición a plaguicidas es posible que se presenten afectaciones en el funcionamiento del cuerpo humano, que provoquen intoxicaciones en el momento (intoxicaciones agudas) o a lo largo del tiempo (intoxicaciones crónicas) asociadas a un mal manejo de los plaguicidas (Cervantes et al., 2006; Instituto Nacional de Salud [INS], 2010).

Con el fin de reducir los riesgos en la salud de los individuos en contacto con plaguicidas, uno de los criterios propuestos en el Código de Conducta para la Distribución y Utilización de Plaguicidas, es la implementación de un programa de vigilancia (FAO, 2014). De acuerdo con esto, en Colombia, específicamente en el ámbito ocupacional, el Plan Decenal de Salud Pública 2012-2021, adoptado mediante Resolución 1841 de 2013 (Ministerio de Salud y Protección Social [MinSalud], 2013b), señala como una de las estrategias del componente de situaciones prevalentes de origen laboral, la de promover la vigilancia epidemiológica ocupacional. El propósito de este tipo de vigilancia es identificar los riesgos y las consecuencias de estos sobre la salud de los trabajadores, con especial atención a la exposición a plaguicidas en el sector agrícola (MinSalud, 2013a).

En el contexto nacional, el país cuenta con diferentes documentos técnicos como los emitidos por el INS, entre los cuales se encuentra el “Protocolo de vigilancia en salud pública, intoxicaciones por sustancias químicas”(INS, 2016b)y el “Manual de intoxicaciones por sustancias químicas”(INS, 2018). Así mismo, los publicados por el Ministerio de Salud y Protección Social, tales como la “Guía para el manejo de urgencias toxicológicas”(MPS, 2008b)y las guías de atención integral de salud ocupacional basadas en la evidencia, adoptadas medianteResolución 1013 del 2008(MPS, 2008c), entre ellas la de trabajadores expuestos a plaguicidas inhibidores de la colinesterasa (MPS, 2008a).

En todos estos documentos, la principal prueba de laboratorio que se emplea para vigilar a trabajadores ocupacionalmente expuestos a plaguicidas organofosforados, es el análisis de laboratorio de la actividad de las enzimas colinesterasas, bien sea la colinesterasa plasmática (CP), la colinesterasa eritrocitaria (CE) o ambas (INS, 2016; Minsal de Chile, 2014; MSCBS de España, 1999). Se usan las enzimas colinesterasas (CP y CE) como biomarcadores, porque permiten identificar el efecto tóxico de los plaguicidas inhibidores de la colinesterasa como los organofosforados, ya que cuando este tipo de plaguicidas es absorbido en el cuerpo, se une al sitio activo de las enzimas reduciendo sus niveles de actividad (Fernández, Mancipe & Fernández, 2010).

Teniendo en cuenta estas consideraciones, el presente estudio se planteó como objetivo evaluar los niveles de CP como biomarcador de exposición a plaguicidas en floricultores de los municipios de Chiquinquirá y Toca, del departamento de Boyacá, Colombia.

Materiales y métodos

Área de estudio

El estudio se realizó en los municipios de Chiquinquirá y Toca, departamento de Boyacá (Colombia); el primero se encuentra a 5º 37' 10" latitud y 73º 49' 15" longitud, y el segundo a 5º 33' 50" latitud y73º 11' 30"longitud(Gobernación de Boyacá, 2016).En cuanto a la producción agrícola para el año 2015, el municipio de Chiquinquirá reportó cultivos de curuba, mora y tomate de árbol; para este mismo año Toca registró cultivos de clavel, girasol, mini clavel y rosa (Gobernación de Boyacá, 2016).

Muestra

Se elaboró un estudio descriptivo de corte transversal, con 76 trabajadores expuestos a plaguicidas, pertenecientes a tres empresas floricultoras de los municipios de Chiquinquirá (n=1) y Toca (n=2) entre los años 2015 a 2017. Se emplearon como criterios de inclusión: floricultores expuestos a plaguicidas, mayores de 18 años y de cualquier sexo.Adicionalmente, la muestra de estudio fue clasificada según el tipo de exposición, estableciéndose como expuestos directos aquellos floricultores que manipularon o tuvieron contacto habitual o regular con plaguicidasal desarrollar labores relacionadas con la mezcla, carga y fumigación de estas sustancias, por lo menos durante los últimos seis meses previos al estudio. Estos criterios fueron establecidos acorde con investigaciones relacionadas con el tema de la investigación(Alvarado et al., 2019; Butinof et al., 2017; Hanna & Orozco, 2014; Nganchamung, Robson & Siriwong, 2017; Palacios& Paz, 2011; Simoniello, Kleinsorge& Carballo, 2010; Varona & De Segurado, 2007).Finalmente, fue posible evaluar de manera longitudinal los niveles de CPen 14 trabajadores, a lo largo de dos otresperiodos de medición.

Prueba de colinesterasa plasmática

La prueba de CP en los trabajadores expuestos ocupacionalmente a plaguicidas, fue procesada mediante el kit de Colinesterasa Liquiform de la casa comercial Labtest Diagnóstica S.A. El kit utilizó los parámetros del test de Gernon planteado por la Sociedad Alemana de Química Clínica (Deutsche Gesellschaft für Klinische Chemie, DGKC), los cuales se basan en el método de Ellman (Maia, Pérez & Soler, 2012). El método de Ellmanmide la producción de tiocolina procedente de la acción de la enzima colinesterasa que hidroliza el sustrato butirilcolina en tiocolina y butirato. La producción de tiocolina está directamente relacionada con la actividad de la enzima presente en la muestra de sangre, a mayor actividad de la colinesterasa, mayor tiocolina (Ellman, Courtney, Andres & Featherstone, 1961). La diferencia entre el test Gernony el método de Ellman, es que el test de Gernon emplea el ferricianuro de potasio por ser más específico para la CP (Maia et al., 2012).La longitud de onda utilizada en la lectura fue de 405 nm, la temperatura de la reacción fue de 37⁰C y el intervalo de tiempo entre lecturas fue de 30 segundos. Los valores de la actividad CP fueron expresados en unidades por litro (U/L).

Para la interpretación de los resultados se utilizaron los siguientes rangos de normalidad: 3930 a 10800 U/L para hombres entre 16 a 39 años,2800 a 7400 U/L para mujeres no embarazadas de16 a 39 años, y 3500 a 8500 U/L para hombres y mujeres mayores de 40 años.

Análisis y tratamiento de los datos

Como variables categóricas se tuvieron en cuenta, sexo, empresa, oficio o labor y tipo de exposición, y como variables cuantitativas se evaluaron la edad y los niveles de colinesterasa expresados en U/L. Se estableció la distribución de frecuencias absolutas y relativas para cada conjunto de datos pertenecientes a variables categóricas. Como medidas de tendencia central se calcularon la media y la desviación estándar o la mediana y rango intercuartil, según normalidad de los datos, evaluada mediante las pruebas de Kolmogorov-Smirnov y de Shapiro-Wilk según el caso. Las diferencias entre dos grupos se compararon mediante la prueba de Chi-cuadrado o prueba exacta de Fisher, para las variables categóricas, tales como: sexo, rangos de edad, tipo de exposición, oficio o labor. Para variables continuas se usaron las pruebas de t-test de Student (medias de CP vs. sexo, tipo de exposición respectivamente) y U de Mann-Whitney (edad vs. sexo), según distribución de los datos. Los análisis de varianza (ANOVA) para un factor se aplicaron para comparar simultáneamente tres o más medias en grupos independientes (medias de CP vs. rangos de edad, empresa, oficio o labor); de igual forma, se empleó el modelo factorial de análisis de varianza para evaluar el efecto individual y conjunto de dos o más factores (variables independientes categóricas: medias de CP vs. rango de edad y sexo) sobre una variable dependiente cuantitativa (valores de CP). Finalmente, los modelos de análisis de varianza (ANOVA) de un factor con medidas repetidas (MR) se usaron para comparar la diferencia entre las medias de CP en floricultores con mediciones en dos o tres periodos anuales.

Todas las pruebas fueron de dos colas y se tuvo en cuenta un valor de probabilidad de 0.05 con un nivel de significancia estadística del 5%. Los datos colectados del estudio fueron sistematizados en una base de datos Excel y procesados en el paquete de software IBM SPSS Statistics Base v23.0.

Este estudio fue aprobado por elComité de Ética de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia en la reunión del 3 de diciembre del 2018; asimismo, siguió los lineamientos jurídicos y éticos contemplados en la última modificación (Edimburgo, Escocia, octubre de 2000) de la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial (“Principios éticos para la investigación que involucra sujetos humanos”) y la Resolución 8430 de 1993 del Ministerio de Salud y Protección Social de Colombia, por la cual se establecen las normas científicas, técnicas y administrativas para la investigación en salud.

Resultados

Características de la serie de estudio

En la Tabla 1 se describen las características de la muestra analizada en este estudio.

De la cohorte de trabajadores analizada, el88%correspondió a hombres y el 12% a mujeres.Las edades oscilaron en un rango entre 18 a 67 años, con una mediana 29,50 (RI: 23-39) años. La edad media para los hombres fue de 31,45 (±12,232), con un valor mínimo de 18 y valor máximo de 67 años. Para las mujeres,la mediana de edad fue de 36 (RI: 32-45,5) años, en el intervalo de 29 a 57 años. Se encontraron diferencias en la distribución de las edades entre hombres y mujeres (U de Mann-Whitney p= 0,02) (Tabla1).

Del total de la muestra analizada, el 43.4% de los trabajadores se encontraba en un rango de edad de 18 a 26 años. Hubo una diferencia significativa en los rangos de edad entre hombres y mujeres (p= 0,016), así pues, el 44.4% de las trabajadoras estaba en el rango de edad entre 35 a 44 años, mientras que el 49.3% de trabajadores estaba en el rango de18 a 26 años (Tabla 1).

En relación con la distribución de las empresas, el 59.2%hizo parte de la empresa codificada como uno; el 23.65%,de la empresa dos; y el 17.11%, de la empresa tres.El 83.3%de los trabajadores reportaron ser expuestos directos, mientras que el 16.7% fueron expuestos indirectos, siendo los hombres mayormente expuestos de manera directa a plaguicidas respecto a las mujeres (87.3% vs. 40%, p=0,029). En cuanto a los oficios reportados por los trabajadores con exposición directa a plaguicidas (60/76), se encontró que el 80% eran operarios, y en menor proporción se destacan monitores de fumigación (6%), fumigadores (4%) y regadores (4%). El 100% de las mujeres con exposición directa eran operarias, y en cuanto a los hombres, además de ejercer oficios de operario (79.2%) también desempeñaron otras labores relacionadas con exposición directa a plaguicidas, las cuales se detallan en la Tabla 1. En cuanto a los expuestos indirectos, cabe resaltar los oficios de supervisor (40%) y de mantenimiento (20%) (Figura 1).

Valores de colinesterasa plasmática en la muestra de estudio

Teniendo en cuenta los valores de referencia del método cinético DGKC usadosen este estudio para evaluar los niveles de CP,se pudo establecer queel 98.7% de los floricultores presentaron niveles normales en la actividad de la enzima. El valor promedio de CP obtenido en la muestra total de estudio fue de 8063,78 ± 1934.01 U/L.

La CP en hombres estuvo en el rango de 3422,4 a 12548,8 U/L con una media de 8135,36 ± 1981,88 U/L.En las mujeres, el valor mínimo observado fue de 5034,4 y el máximo de 9498,4, con una media de 7530.93 ± 1516,15 U/L, el cual fue menor con respecto a los trabajadores de sexo masculino; sin embargo, no se identificó una diferencia estadísticamente significativa (Prueba t-test de varianzas iguales p= 0,382).

LaFigura 1 muestra los niveles de CP en los floricultores formales expuestos a plaguicidas según rangos de edad.Se observa que no hubo diferencias significativas en las medias de estos gruposal compararlos tanto con la serie global (ANOVA de un factor de varianzas iguales, p= 0,513) como por sexo (ANOVA factorial de la varianza, p= 0,433). Sin embargo, cabe resaltar que los valores de colinesterasa fueron más bajos en los trabajadores menores de 45 años (<45 años: 7908,49 ± 1988,120 vs. ≥ 45 años 8751,50 ± 1551,722, Prueba t-test de varianzas iguales p=0,142) (Figura 2).

El valor de la media de la actividad de la CP en la empresa uno (Chiquinquirá) fue de7645,86 ± 1907,768 U/L, valor mínimo 3422 y máximo 10044 U/L; en la empresa dos(Toca) la media fue 7429,76 ± 1192,371 U/L, valor mínimo 5034 U/L y máximo 8978 U/L y en la empresa tres (Toca) media 8438,12 ± 2115,269 U/L, valor mínimo 4662 U/L y máximo 12549 U/L.No existieron diferencias significativas entre las medias de la actividad de la enzima observadas en los trabajadores de las diferentes empresas (ANOVA de un factor, p= 0,120); no obstante, se evidenció que la empresa de flores número dosubicada en el municipio de Toca,presentó la media de la actividad de la enzima más baja 7429,76 ± 1192,371 U/L con respecto a las otras empresas.

La media de CP en fumigadores fue de 6522,40 ± 2174,49 U/L, en individuos dedicados a actividades de mantenimiento de 7626 ±1911,451 U/L; en los monitores de fumigación7814,80± 1596,41 U/L, en operarios 8182,65 ± 2145,064, en regadores 6956,40 ± 2262,17y en supervisores 8258,40 ± 455,042.No hubo diferencias significativas en las medias entre estos oficios (ANOVA de un factor de varianzas iguales, p= 0,752); sin embargo, se observa que la media deCP es menor en los fumigadores y regadores con respecto a las otras labores.De igual manera, no se encontró una diferencia significativa entre labores con exposición directa e indirecta (Prueba t-test de varianzas iguales, p= 0,329); aunque se observó una media más baja de CP en floricultores con exposición directa (8048,68 ± 2058,85 U/L) frente a aquellos con exposición indirecta (8726,68 ±1569,17 U/L) (Figura 3).

Floricultores formales con más de una medición de colinesterasa plasmática entre 2015 a 2017

Adicionalmente, fue posible evaluar de manera longitudinal los niveles de CP en 14 trabajadores, a través de dos o tres periodos de medición. En la primera medición (n=14), la media de la CP fue de 9192,37 ± 1419,22, con un valor mínimo de 7043,20 U/L y un valor máximo de 11480 U/L; para la segunda medición (n=14), la media de colinesterasa fue de 8595,76 ± 1731,54 U/L entre 5522,40 U/L a 11651,04 U/L, y en la tercera medición (n=7) el valor medio de la CP fue de 8176,80 ± 2163 U/L en un rango de 5183,20 U/L a 11109,60 U/L. Aunque se apreció una disminución entre las medias de CP durante las mediciones 1 y 2 y mediciones 1, 2 y 3, el análisis de varianza con medidas repetidas en el tiempo (MR-ANOVA) no arrojó diferencias significativas entre las medias de la actividad de CP durante los tres periodos anuales de medición (p=0,25).

Discusión y conclusiones

En la vigilancia epidemiológica ocupacional a plaguicidas, la prueba de laboratorio de las enzimas colinesterasas es utilizada para determinar de forma temprana la exposición a este tipo de compuestos, con el fin de evaluar aspectos del trabajo que puedan generar alteraciones y deterioro en la salud de los trabajadores (INS, 2010; Minsal de Chile, 2014; MSCBS de España, 1999; OEHHA, 2015).

De acuerdo con el tiempo, el contexto y la cantidad de plaguicida, la exposición a PO se clasifica como aguda y crónica(INS, 2010).Es posible identificar una intoxicación aguda cuando se reportan valores deprimidos de la actividad de CP y aparecen síntomas negativos para la salud (Neupane, Jørs, & Brandt, 2017). Se emplea la CP, porque con respecto a la CE tarda menos tiempo en disminuir sus niveles, así como en recuperarlos entre días a semanas. Por su parte, debido a que la CE requiere más tiempo en deprimirse y volver a sus niveles de normalidad, entre uno a tres meses, esta es la utilizada para determinar una intoxicación crónica (Carmona, 2006; Cotton, Edwards, Rahman& Brumby, 2018; Restrepo, Londoño & Sánchez, 2017). Por lo tanto, debido a que los niveles inhibidos son más prolongados, la CE se emplea en casos donde se presume que han ocurrido exposiciones previas entre un tiempo de tres a cuatro meses (INS, 2016b; Minsal de Chile, 2014; MSCBS de España, 1999).

Las diferencias en los tiempos de recuperación de estas enzimas se encuentran asociadas al tipo de células en las cuales estas se sintetizan, las hepáticas para la CP y los glóbulos rojos para la eritrocitaria (Cotton et al., 2018). En este estudio se evaluaron 76 trabajadores expuestos a plaguicidas que desempeñaron labores en empresas de flores de los municipios de Chiquinquirá y Toca, departamento de Boyacá. Se encontró una diferencia en la proporción de trabajadores analizados de acuerdo con el sexo (p=0,02);es así como se observó que prevaleció el trabajo en el género masculino.Estos resultados concuerdan con lo reportado en estudios nacionales llevados a cabo en los departamentos de Boyacá,donde encontraron que el 75.6% (68/90) fueron hombres trabajadores en invernaderos de cultivo de tomate(Rodríguez, Garzón, Parra & Mojica, 2010); Caldas, el 90.9% (120/132) de trabajadores agrícolas de tomate eran hombres(Varona et al., 2012); Cauca con un63.2% (79/125) de trabajadores de cultivo de papa (Díaz, Sánchez, Varona, Eljach & Muñoz, 2017); Córdoba con un97% (181/187) de trabajadores de cultivo de algodón(Hanna & Orozco, 2014); Magdalena con un 92.5% (74/80) de trabajadores bananeros(Lozano, 2015) y Putumayo con un 86.8% (177/204)de trabajadores del sector agrícola(Varona et al., 2007).

Con respecto a la edad, la mayor parte de los trabajadores formales estuvieron en un rango de edad entre 18 a 26 años (43.42%, 33/76), lo cual evidencia que son parte de la población laboralmente activa del país.Este hallazgo fue similar al de Rodríguez et al. (2010), quienes reportaron que el 40% (36/90) de la muestra de agricultores del municipio de Villa de Leyva, departamento de Boyacá, presentaron edades entre 15 a 29 años (Rodríguez et al., 2010). De igual manera, Lozano (2015) reportó el mayor porcentaje de trabajadores bananeros del departamento de Magdalena (53.75% (43/80)) en el rango de 18-34 años, lo cual concuerda con nuestro estudio donde el 64.5% (49/76)de floricultores pertenecieron a ese rango de edad.

En cuanto a la determinación de la colinesterasa, en los trabajadores estudiados se observó que el 98.68% (75/76) de los valores de CP se encontraron dentro de los valores de referencia normales y el 1.32% (1/76) tuvo valores por debajode 3930 U/L. Este bajo porcentaje de trabajadores con niveles reducidos de CP también ha sido identificadopor estudios previos nacionales como el de Lozano (2015), quien encontró niveles disminuidos en la enzima tan solo en el 11.1% (10/80, método de Ellman, VR: 3.200 a 9.000 U/L) y Toro, Rojas y Díaz (2018) en un 3.8 % de caficultores del departamento de Caldas (42/1.098, método Ellman, VR: 4.659 a 14.443 U/L).En estudios internacionales como el de Marrero, Guevara, Eblen y Sequera (2018), en el 15% de trabajadores agrícolas de Venezuela (3/30, método Ellman, VR: 4,970 a 13,977 U/L), Neupane et al. (2017) en el 8.51% de agricultores de Nepal (2/25, método Ellman, VR: 1,35 a 3,23 U/ml) y Butinof et al. (2017), quienes no encontraron inhibición de la enzimaCP en los 99 agroaplicadores argentinos analizados (Ellman, VR: 3200 a 9000 U/l)(Marrero et al., 2018; Toro et al., 2018).

En el caso de CE, Varona et al. (2007) observaron inhibición de la enzima en el 26.5% (54/204) de los trabajadores agrícolas analizados del departamento de Putumayo; Amaya, Roa, Camacho y Meneses (2008), en el 100% (50/50) de agricultores de Cundinamarca (Colombia); Varona et al. (2012) en el 34.1% (45/132) de cultivadores del departamento de Caldas; Hanna y Orozco (2014), en el 9.6% (18/187) de los agricultores del departamento de Córdoba. Y de los estudios que evaluaron las dos enzimas, Díaz et al. (2017) hallaron que el 8% (10/125) de los agricultores de cultivo de papa del departamento de Cauca tuvieron inhibición de la CE y ninguno en la CP.

Cabe resaltar que, aunque no se encontró asociación de la actividad de la CP con el sexo, la edad, el cargo, el tipo de exposición, se observó que la actividad de la enzima presentaba valores menores en trabajadores de sexo masculino, particularmente en los trabajadores menores de 45 años, y en los floricultores con exposición directa a plaguicidas, principalmente en fumigadores y regadores. Estos hallazgos son respaldados por Cuaspud y Vargas (2010),quienes afirman que en los intervalos de edad de 32 a 38 años se encuentra la mayor cantidad de trabajadores activos y, por ende, son los que tienen mayor exposición a los plaguicidas.Igualmente, Simoniello et al. (2010) establecieron que los niveles de colinesterasa eritrocintaria presentaron mayor disminución en expuestos directos frente a expuestos indirectos.En el estudio de Hanna et al. (2014) se encontró que de 187 agricultores del departamento de Córdoba (Colombia), a quienes se les evaluó la CE mediante el método Lovibond, el 9.63 % de los agricultores tuvo niveles por debajo de lo normal y de estos, el 4.81 % eran fumigadores y el 3.74 % recolectores,oficios donde hubo una manipulación directa con plaguicidas (Hanna et al., 2014).

Finalmente, en el presente estudio no se evidenciaron diferencias significativas entre las medias de la actividad de CP durante los tres periodos anuales de medición (p=0,25), lo cual concuerda con lo reportado por Cotton et al. (2018),quienes tampoco hallaron diferencia significativa en la actividad promedio de la CE al comparar su actividad entre 41 agricultores y 14 no agricultores australianos antes y después de la exposición, durante cuatro puntos temporales 3–4 semanas, 6-7 semanas, 9-12 semanas y 10–12 semanas.

En resumen, los resultados anteriormente descritos señalan que el 98.68% de los floricultores analizados presentaron niveles normales de CP, lo cual indica que casi la totalidad de estos trabajadores no presentaban intoxicación aguda por exposición a plaguicidas y que posiblemente estos trabajadores estén laborando en empresas de flores de los municipios de Chiquinquirá y Toca, del departamento de Boyacá, donde se está prestando atención e implementando medidas de prevención que disminuyen la exposición a plaguicidas inhibidores de la colinesterasa, de acuerdo con los sistemas de control en la fuente, el medio y el receptor, en cumplimiento de la normativa nacional vigente. Es recomendable complementar el análisis en este tipo de trabajadores con la medición de los niveles de la CE, con el fin de descartar intoxicaciones crónicas y realizarles un estricto seguimiento y control de signos y síntomas asociados a este tipo de exposición.

Agradecimientos

Los autores agradecen a la Dirección de Investigaciones de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, por la financiación del proyecto de investigación titulado “Evaluación de la actividad de la colinesterasa plasmática como biomarcador de efecto de insecticidas organofosforados en trabajadores de empresas agropecuarias y de flores del departamento de Boyacá, Colombia”, durante los periodos 2015-2018, SGI 2503”, en el marco de la convocatoria DIN 2018 N.° 9 - Apoyo maestrías en investigación y doctorados.

Contribución de los autores

LJC-G y MF-C escribieron el manuscrito. VET-T, DXS-P y AED-B recolectaron y sistematizaron los datos del estudio, todos los autores contribuyeron a la revisión y corrección de las diferentes versiones del manuscrito. MF-C y AED-B diseñaron el estudio, revisaron y aprobaron la versión final del manuscrito.

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Información adicional

Para citar este artículo:: Caro-Gamboa, L. J., Forero-Castro, R. M., Torres-Torres, V. E., Suárez-Pulido, D. X., & Dallos-Báez, A. E. (2019). Evaluación de colinesterasa plasmática en floricultores de los municipios de Chiquinquirá y Toca, Boyacá, Colombia. Pensamiento y Acción, 27, 21-42.