Ir al menú de navegación principal Ir al contenido principal Ir al pie de página del sitio

Evaluación de la sanidad de material de propagación de cítricos frente al viroide del enanismo del lúpulo mediante diagnóstico biológico y molecular

Collection of micrografted citrus varieties, preserved in an aphid-proof mesh greenhouse at Agrosavia, Centro de Investigación Palmira, Valle del Cauca, Colombia. Photo: N. Murcia-Riaño

Resumen

El viroide del enanismo del lúpulo (HSVd) es el agente causal de la cachexia de los cítricos, que puede provocar pérdidas significativas en el cultivo. Como parte de una estrategia de manejo preventivo, es indispensable utilizar plantas sanas provenientes de un programa de certificación. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la sanidad de 17 cultivares de cítricos frente a HSVd, utilizando diagnósticos biológico y molecular. Para el diagnóstico biológico, se empleó como planta indicadora cidro Etrog (Citrus medica L.) clon Arizona 861 S1, incluyendo controles negativos y positivos para la infección por HSVd. Para el diagnóstico molecular se utilizó la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcriptasa inversa (RT-PCR) con cebadores específicos para la detección del viroide. Los resultados indicaron que seis meses después de la inoculación, el control positivo mostró síntomas asociados con la infección por el viroide, como necrosis en el peciolo y tallo, epinastia foliar y necrosis en vena media. Por el contrario, tanto el control negativo como los cultivares de cítricos evaluados no presentaron síntomas. Estos resultados fueron corroborados por el análisis molecular, que permitieron amplificar una región del genoma del viroide, únicamente en el control positivo. Ambos diagnósticos biológico y molecular confirmaron la ausencia de HSVd en las variedades de cítricos evaluadas. Este estudio permitirá evaluación de las colecciones de plantas de cítricos utilizadas en la categoría fundación como fuente de yemas para la multiplicación de semilla registrada y certificada para los viveros productores de material de propagación de cítricos en Colombia.

Palabras clave

Viroide, Amplificador biológico, RT-PCR, Cítricos, Diagnóstico, Indexaje

XML (English) PDF (English)

Citas

  1. Barbosa, C.J., J.A. Pina, J. Pérez-Panadés, L. Bernad, P. Serra, L. Navarro, and N. Duran-Vila. 2005. Mechanical transmission of citrus viroids. Plant Dis. 89(7), 749-754. Doi: https://doi.org/10.1094/PD-89-0749
  2. Belabess, Z., N. Radouane, T. Sagouti, A. Tahiri, and R. Lahlali. 2021. A current overview of two viroids prevailing in citrus orchards: Citrus exocortis viroid and Hop stunt viroid. pp. 589-694. In: Khan, M.S. and I.A. Khan (eds.). Citrus - research, development and biotechnology. IntechOpen, London. Doi: https://doi.org/10.5772/intechopen.95914
  3. Bernad, L. and N. Duran-Vila. 2006. A novel RT-PCR approach for detection and characterization of citrus viroids. Mol. Cell. Probes 20(2), 105-113. Doi: https://doi.org/10.1016/j.mcp.2005.11.001
  4. Bové, J.M. 2006. Huanglongbing: a destructive, newly-emerging, century-old disease of citrus. J. Plant Pathol. 88(1), 7-37.
  5. Camps, R., M. Castro, and X. Besoain. 2014. Simultaneous detection of CTV, CEVd and HSVd using Arizona 861 S1 Citron and RT-PCR. Cien. Inv. Agr. 41(2), 255-261. Doi: https://doi.org/10.4067/S0718-16202014000200012
  6. Chang, S., J. Puryear, and J. Cairney. 1993. A simple and efficient method for isolating RNA from pine trees. Plant Mol. Biol. Rep. 11(2), 113-116. Doi: https://doi.org/10.1007/BF02670468
  7. Dawson, W.O., M. Bar-Joseph, S.M. Garnsey, and P. Moreno. 2015. Citrus tristeza virus: making an ally from an enemy. Annu. Rev. Phytopathol. 53, 117-155. Doi: https://doi.org/10.1146/annurev-phyto-080614-120012
  8. Du, Z., J. Chen, and C. Hiruki. 2006. Optimization and application of a multiplex RT-PCR system for simultaneous detection of five potato viruses using 18S rRNA as an internal control. Plant Dis. 90(2), 185-189. Doi: https://doi.org/10.1094/PD-90-0185
  9. Duran-Vila, N. 1989. Enfermedades producidas por viroides: la exocortis de los cítricos. Phytoma (7), 19-25.
  10. Duran-Vila, N. 2004. Enfermedades de cítricos causadas por viroides: exocortis y caquexia. Vida Rural (188), 52-56.
  11. Duran-Vila, N., J.A. Pina, J.F. Ballester, J. Juárez, C.N. Roistacher, R. Rivera-Bustamante, and J.S. Semancik. 1988. The citrus exocortis disease: a complex of viroid-RNAs. pp. 152-164. Proc 10th Conf. Int. Org. Citrus Virol. IOCV, Riverside CA. Doi: https://doi.org/10.5070/C54CF7N8QB
  12. Duran-Vila, N., J.A. Pina, and L. Navarro. 1993. Improved indexing of citrus viroids. pp. 202-211. In: Moreno P., J.V. da Graca, and L.W. Timmer (eds.) Proc. 12th Conf. Int. Organ. Citrus Virol. IOCV. Riverside, CA. Doi: https://doi.org/10.1023/A:1008711402856
  13. Duran-Vila, N., J.S. Semancik, and P. Broadbent. 2000. Viroid diseases, cachexia and exocortis. pp. 51-54. In: Timmer, L.W., S.M. Garnsey, and J.H. Graham (eds.). Compendium of citrus diseases. 2nd ed. APS, St. Paul, MN.
  14. Eiras, M., S.R. Silva, E.S. Stuchi, S.A. Carvalho, and R.M. Garcêz. 2013. Identification and characterization of viroids in 'Navelina ISA 315' sweet orange. Trop. Pant Pathol. 38(1), 58-62. Doi: https://doi.org/10.1590/S1982-56762013000100009
  15. Guerrero, C.E., O.G. Alvarado, H. Gutiérrez, R. Gozález, M.G. Álvarez, and M. Luna. 2013. Detección por RT-PCR punto final y tiempo real de tres especies de viroides en cítricos de Nuevo León y Tamaulipas, México. Rev. Mex. Fitopatol. 31(1), 20-28.
  16. ICA, Instituto Colombiano Agropecuario. 2019. Resolución 12816, Por medio de la cual se establece los requisitos para el registro ante el ICA de los viveros y/o huertos básicos productores y/o comercializadores de semilla sexual y/o asexual (material vegetal de propagación) de cítricos, así como los requisitos fitosanitarios para la conservación, producción, certificación y distribución de material de propagación de cítricos en viveros, en el territorio nacional. Bogota.
  17. Koetsier, G. and E. Cantor. 2019. A practical guide to analyzing nucleic acid concentration and purity with microvolume spectrophotometers. N. Engl. Biolabs 1, 1-8.
  18. Lin, C.Y., M.-L. Wu, T.-L. Shen, H.-H. Yeh, and T.-H. Hung. 2015. Multiplex detection, distribution, and genetic diversity of Hop stunt viroid and Citrus exocortis viroid infecting citrus in Taiwan. Virol. J. 12, 11. Doi: https://doi.org/10.1186/s12985-015-0247-y
  19. MADR, Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. 2021. Cadena de los cítricos. Indicadores e instrumentos. Segundo trimestre 2021. In: Sistema de información de gestión y desempeño de organizaciones de cadenas – SIOC, https://sioc.minagricultura.gov.co/Citricos/Documentos/2021-06-30%20Cifras%20Sectoriales.pdf ; consulted: May, 2023.
  20. Mosquera, V., M.F. Martínez, W.J. Cuellar, J. Vaca-Vaca, I. Lozano, and N. Murcia. 2015. Detection of viroids and Citrus tristeza virus (CTV) in Tahití Lime Citrus latifolia (Tanaka) Through application of RT-PCR. p. 59. In: Libro de resúmenes, XXXlll Congreso Colombiano de Fitopatología y ciencias afines. Palmira, Colombia.
  21. Murcia, N., L. Bernad, A. Caicedo, and N. Duran-Vila. 2010. Citrus viroids in Colombia. pp. 158-166. In: Proc. 17th Int. Org. Citrus Virol. IOCV. Riverside, CA. Doi: https://doi.org/10.5070/C5008577NK
  22. Murcia, N., M. Betancourt, L. Pérez, D.M. Rodríguez, L. Ríos, Y.C. Pisco, and M.F. Martínez. 2020. Principales enfermedades en el cultivo de lima ácida Tahití. pp. 257-325. In: Castillo-Montaña, P. and L. Gaona. (ed.). Modelo productivo de lima ácida Tahití (Citrus × latifolia Tanaka ex Q. Jiménez) para Colombia. Agrosavia, Mosquera, Colombia. Doi: https://doi.org/10.21930/agrosavia.model.7403435
  23. NAPPO, North American Plant Protection Organization. 2013. NRMF 16. Medidas integradas para la movilización de material propagativo de cítricos. Ottawa.
  24. Ohno, T., N. Takamatsu, T. Meshi, and Y. Okada. 1983. Hop stunt viroid: molecular cloning and nucleotide sequence of the complete cDNA copy. Nucleic Acid Res. 11(18), 6184-6196. Doi: https://doi.org/10.1093/nar/11.18.6185
  25. Rakowski, A.G., J.A. Szychowski, Z.S. Avena, and J.S. Semancik. 1994. Nucleotide sequence and structural features of the group III citrus viroid. J. Gen. Virol. 75(12), 3581-3584. Doi: https://doi.org/10.1099/0022-1317-75-12-3581
  26. Reanwarakorn, K. and J.S. Semancik. 1998. Regulation of pathogenicity in hop stunt viroid related group II citrus viroids. J. Gen. Virol. 79(12), 3163-3171. Doi: https://doi.org/10.1099/0022-1317-79-12-3163
  27. Reanwarakorn, K. and J.S. Semancik. 1999. Correlation of Hop stunt viroid variants to cachexia and xyloporosis disease of citrus. Phytopathol. 89(7), 568-574. Doi: https://doi.org/10.1094/PHYTO.1999.89.7.568
  28. Rodríguez-Mora, D., V. Mosquera, M. Martínez, and N. Murcia. 2015. RT-PCR multiplex for detection of viroids in Tahiti acid lime (Citrus latifolia Tanaka). p 60. In: Libro de resúmenes, XXXII Cong. Colomb. Fitopatol. and I Simp. Int. Fusarium. Cajica, Colombia.
  29. Rodríguez-Mora, D., L. Palacios, M. Martínez, and N. Murcia. 2017. Collection of work of citrus varieties free of tristeza, exocortis, and huanglongbing. p 35. En: Libro de resúmenes, V Simp. Int. Frutic. Trop. Subtropical and IX Simp. Int. Piña “Fruticultura”. La Habana.
  30. Rodríguez-Mora, D., L. Palacios, M.F. Martínez, and N. Murcia. 2022. Manejo de enfermedades de cítricos en ambiente protegido. pp. 151-216. In: Gaona-García, L. (ed.). Bases tecnológicas para la producción de material de siembra de alta calidad de las especies cítricas para Colombia. Agrosavia, Mosquera, Colombia. Doi: https://doi.org/10.21930/agrosavia.manual.7405682
  31. Semancik, J.S., C.N. Roistacher, R. Rivera-Bustamante, and N. Duran-Vila. 1988. Citrus cachexia viroid, a new viroid of citrus: relationship to viroids of the exocortis disease complex. J. Gen. Virol. 69(12), 3059-3068. Doi: https://doi.org/10.1099/0022-1317-69-12-3059
  32. Semancik, J.S. and L.G. Weathers. 1972. Exocortis disease: evidence for a new species of “infectious” low molecular weight RNA in plants. Nature New Biol. 237, 242-244. Doi: https://doi.org/10.1038/newbio237242a0
  33. Serra, P., S. Gago, and N. Duran-Vila. 2008. A single nucleotide change in Hop stunt viroid modulates citrus cachexia symptoms. Virus Res. 138(1-2), 130-134. Doi. https://doi.org/10.1016/j.virusres.2008.08.003
  34. Serra, P., A. Messmer, D. Sanderson, D. Sanderson, D. James, and R. Flores. 2018. Apple hammerhead viroid-like RNA is a bona fide viroid: autonomous replication and structural features support its inclusion as a new member in the genus Pelamoviroid. Virus Res. 249, 8-15. Doi: https://doi.org/10.1016/j.virusres.2018.03.001
  35. Teymuri, P., S. Nasrollanejad, V. Alavi, and M. Taghinasab. 2022. Biological characteristics of Citrus cachexia viroid isolates in local tangerine orchards (Citrus unshiu Marcovitch) in East Mazandaran. Appl. Entomol. Phytopathol. 90(1), 87-97. Doi: https://doi.org/10.22092/JAEP.2022.359220.1444
  36. Vamenani, R., H. Rahimian, S.M. Alavi, and V. Babaeizad. 2014. Detection of hop stunt viroid in lemon, sweet lime, clementine and satsuma mandarins and grapefruit trees in mazandaran. Iran. J. Plant Path. 50(2), 105.
  37. Venkataraman, S., U. Badar, E. Shoeb, G. Hashim, M. AbouHaidar, and K. Hefferon. 2021. An inside look into biological miniatures: molecular mechanisms of viroids. Int. J. Mol. Sci. 22(6), 2795. Doi: https://doi.org/10.3390/ijms22062795
  38. Vernière, C., X. Perrier, C. Dubois, A. Dubois, L. Botella, C. Chabrier, J.M. Bové, and N. Duran Vila. 2004. Citrus viroids: symptom expression and effect on vegetative growth and yield of clementine trees grafted on Trifoliate orange. Plant Dis, 88(1), 1189-1197. Doi: https://doi.org/10.1094/PDIS.2004.88.11.1189
  39. Villalobos, W., L. Moreira, V.H. Alfaro, G. Yglesias, and C. Rivera. 2004. Detección del Viroide de la exocortis en una plantación comercial de naranja dulce, utilizando la selección 861-S1 del cidro ‘Etrog’ (Citrus medica L.). Manejo Integrado de Plagas y Agroecología 72, 86-90.
  40. Wang, X., Y. Zhou, Z. Li, K. Tang, Y. Liu, M. Cao, and C. Zhou. 2010. Molecular, biological and phylogenetic analysis of chinese isolates of Hop stunt viroid associated with citrus cachexia disease. J. Phytopathol. 158(5), 372-377. Doi: https://doi.org/10.1111/j.1439-0434.2009.01629.x
  41. Wang, X., C. Zhou, Z. Tang, Y. Zhou, and Z. Li. 2009. A rapid one-step multiplex RT-PCR assay for the simultaneous detection of five citrus viroids in China. Eur. J. Plant Pathol. 124, 175-180. Doi: https://doi.org/10.1007/s10658-008-9386-y
  42. Zeitooni, H., S.M.B. Hashemian, and M. Shams-Bakhsh. 2023. Detection of hop stunt viroid variants from naturally infected kumquat and limequat trees in Mazandaran Province, Iran. J. Phytopathol. 105, 545-556. Doi: https://doi.org/10.1007/s42161-023-01347-8

Descargas

Los datos de descargas todavía no están disponibles.

Artículos similares

También puede {advancedSearchLink} para este artículo.