Actividad Fosfolipasa, Hemolítica y Bactericida preliminar del Veneno de la Serpiente de cascabel del Tolima

Contenido principal del artículo

Autores

Jennifer Alexandra Solano Godoy
Emerson David Molano Cardona
Manuel Hernando Bernal Bautista
Walter Murillo Arango

Resumen

En el departamento del Tolima no hay estudios que permitan precisar con certeza la magnitud del accidente ofídico causado por Crotalus durissus, existiendo la necesidad de generar información sobre el perfil proteico, como forma de aproximación a la compresión de algunas actividades biológicas relacionadas con la toxicidad del veneno, así como su potencial biotecnológico. En este trabajo se analizó el perfil electroforético por SDS-PAGE del veneno crudo extraído de individuos colectados en el municipio de Natagaima (Tolima) y la asociación con actividades fosfolipasa, hemolítica directa e indirecta y bactericida sobre Escherichia coli, Staphylococcus aureus y Pseudomona aeuroginosa. El veneno crudo presentó bandas de peso molecular 26.6 kDa., 17, 14.2, 6.5, 3.5 y 1.06 kDa., correspondientes con otros reportes previos del veneno para la especie. Se presentaron niveles considerables de actividades hemolítica (200 µg) y fosfolipasa (1.25 UA/mg. ± 0.88) dependientes de Calcio, y el efecto bactericida del veneno crudo fue diferencial sobre los microorganismos evaluados, presentando actividad moderada sobre Escherichia coli. Los resultados constituyen datos valiosos que confieren un acercamiento hacia el conocimiento del potencial tóxico del veneno de Crotalus durissus (cascabel) de la zona
de Natagaima-Tolima, así como de la capacidad bactericida y posibles aplicaciones futuras en campos de investigación relacionados con la búsqueda de nuevos agentes antimicrobianos.

Palabras clave:

Detalles del artículo

Referencias

[1] M. J. Sevilla-Sánchez, D. Mora-Obando, J. J. Calderón, J. A. Guerrero-Vargas, and S. Ayerbe-González, “Accidente ofídico en el departamento de Nariño, Colombia: análisis retrospectivo (2008-2017),” Biomédica, vol. 39, no. 4, May 2019, doi: 10.7705/biomedica.v39i4.4830.

[2] M. A. Bárcenas Rojas, “INFORME DE EVENTO ACCIDENTE OFÍDICO, COLOMBIA, 2017,” 2018.

[3] M. Acero and J. Usaquen, “INFORME DEL EVENTO ACCIDENTE OFIDICO HASTA EL PERIODO EPIDEMOLGICO XII, Colombia,2014,” vol. 2. Instituto Nacional de Salud, pp. 1–29, 2014.

[4] J. J. Calvete, L. Sanz, Y. Angulo, B. Lomonte, and J. M. Gutiérrez, “Venoms, venomics, antivenomics,” FEBS Lett., vol. 583, no. 11, pp. 1736–1743, Jun. 2009, doi: 10.1016/j.febslet.2009.03.029.

[5] M. S. R. Gomes et al., “BthMP: a new weakly hemorrhagic metalloproteinase from Bothrops moojeni snake venom,” Toxicon, vol. 53, no. 1, pp. 24–32, Jan. 2009, doi: 10.1016/J.TOXICON.2008.10.007.

[6] O. H. P. Ramos and H. S. Selistre-de-Araujo, “Snake venom metalloproteases — structure and function of catalytic and disintegrin domains,” Comp. Biochem. Physiol. Part C Toxicol. Pharmacol., vol. 142, no. 3–4, pp. 328–346, Mar. 2006, doi: 10.1016/J.CBPC.2005.11.005.

[7] R. Zouari-Kessentini et al., “Two purified and characterized phospholipases A2 from Cerastes cerastes venom, that inhibit cancerous cell adhesion and migration,” Toxicon, vol. 53, no. 4, pp. 444–453, Mar. 2009, doi: 10.1016/J.TOXICON.2009.01.003.

[8] A. C. Patiño, J. A. Pereañez, J. M. Gutiérrez, and A. Rucavado, “Biochemical and biological characterization of two serine proteinases from Colombian Crotalus durissus cumanensis snake venom,” Toxicon, vol. 63, pp. 32–43, Mar. 2013, doi: 10.1016/J.TOXICON.2012.11.010.

[9] J. Quintana-Castillo et al., “Characterization of the Venom of C. d. cumanesis of Colombia: Proteomic Analysis and Antivenomic Study,” Toxins (Basel)., vol. 10, no. 2, p. 85, Feb. 2018, doi: 10.3390/toxins10020085.

[10] I. M. . Francischetti, M. E. . Gombarovits, J. G. Valenzuela, C. R. Carlini, and J. A. Guimarães, “Intraspecific variation in the venoms of the South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus),” Comp. Biochem. Physiol. Part C Pharmacol. Toxicol. Endocrinol., vol. 127, no. 1, pp. 23–36, Aug. 2000, doi: 10.1016/S0742-8413(00)00129-8.

[11] F. E. Lozano Manrique, “purificacion, caracterizacion y actividad biologica de una l-aminoacido oxidasa presente en el veneno de la serpiente Botrops atrox (jergon),” 2005.

[12] F. Lazo, O. Málaga, A. Yarlequé, R. Severino, and S. Gutiérrez, “Actividad antimicrobiana de una flavoproteína aislada del veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox (‘jergón’),” Rev. la Soc. Química del Perú, vol. 73, no. 4, pp. 197–207, 2007.

[13] J. Do Carmo Dietz, D. A. De Almeida, L. C. Cintra, B. F. R. De Oliveira, M. R. Magalhães, and R. S. A. Jesuíno, “Evaluation of the antibacterial activity of Crotalus durissus terrificus crude venom,” Cienc. Anim. Bras., no. 19, pp. 1–12, 2018, doi: 10.1590/1809-6891v19e-51322.

[14] J. L. Rheubert, M. F. Meyer, R. M. Strobel, M. A. Pasternak, and R. A. Charvat, “Predicting antibacterial activity from snake venom proteomes,” PLoS One, vol. 15, no. 1, p. e0226807, Jan. 2020, doi: 10.1371/journal.pone.0226807.

[15] M. M. Bradford, “A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding,” Anal. Biochem., vol. 72, no. 1–2, pp. 248–254, May 1976, doi: 10.1016/0003-2697(76)90527-3.

[16] C. A. Yábar Varas, Manual de procedimientos de electroforesis para proteínas y ADN, 1era. Lima, Perú., 2003.

[17] F. Lazo, E. Rodríguez, and A. Yarlequé, “Evaluación comparativa de dos métodos para determinar la actividad de fosfolipasa en veneno de serpientes.,” Rev. Biol. Trop., vol. 5, pp. 98–102, 1998, doi: https://doi.org/10.15381/rpb.v5i2.8325.

[18] J. A. Pereañez J., S. L. Jiménez., J. C. Quintana., V. Nuñez., M. Fernández., and Y. Restrepo., “Inhibición de las actividades proteolítica, coagulante y hemolítica indirecta inducidas por el veneno de Bothrops asper por extractos etanólicos de tres especies de heliconias,” Vitae (Medellín), pp. 157–164, 2008.

[19] J. M. Gutiérrez, F. Chaves, E. Rojas, J. Elizondo, C. Avila, and L. Cerdas, “Production of monovalent anti-Bothrops asper antivenom: development of immune response in horses and neutralizing ability.,” Rev. Biol. Trop., vol. 36, no. 2B, pp. 511–7, Nov. 1988.

[20] E. Habermann and K. L. Hardt, “A sensitive and specific plate test for the quantitation of phospholipases,” Anal. Biochem., vol. 50, no. 1, pp. 163–173, 1972, doi: 10.1016/0003-2697(72)90495-2.

[21] J. B. Patel et al., Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically, 10th ed., vol. 35, no. 2. Clinical and Laboratory Standarts Institute, 2015.

[22] S. R. Pritchard, M. Phillips, and K. Kailasapathy, “Identification of bioactive peptides in commercial Cheddar cheese,” 2010.

[23] C. Rivera, L. Flores, C. Pantigoso, and E. Escobar, “Aislamiento y caracterización de un péptido antibacteriano del veneno de Centruroides margaritatus,” Rev. Peru. Biol., vol. 17, no. 1, pp. 129–132, 2014, doi: 10.15381/rpb.v17i1.61.

[24] J. do C. Dietz, D. A. de Almeida, L. C. Cintra, B. F. R. de Oliveira, M. R. Magalhães, and R. S. A. Jesuíno, “EVALUATION OF THE ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF Crotalus durissus terrificus CRUDE VENOM,” Ciência Anim. Bras., vol. 19, no. 0, Nov. 2018, doi: 10.1590/1809-6891v19e-51322.

[25] J. C. Quintana-Castillo, I. C. Ávila-Gómez, J. F. Ceballos-Ruiz, L. J. Vargas-Muñoz, and S. Estrada-Gómez, “Efecto citotóxico de fosfolipasas A2 del veneno de Crotalus durissus cumanensis de Colombia,” Rev. Investig. en Salud Univ. Boyacá, vol. 4, no. 1, p. 16, Jul. 2017, doi: 10.24267/23897325.194.

[26] T.-W. Wu and D. O. Tinker, “Phospholipase A2 fromo Crotalus atrox Venom.,” Biochemistry, vol. 8, pp. 1558–1568, 1969.

[27] E. Coles, D. L. Mcilwain, and M. M. Rapport, “The activity of pure phospholipase a2 from crotalus venom on myelin and on pure phospholipids atrox,” Biochimic, vol. 337, pp. 68–78, 1974.

[28] C. Remuzgo, M. P. Alvarez, F. Lazo, and A. Yarleque, “Caracterizacion parcial del veneno de la serpiente cascabel peruana crotalus durissus terrificus,” Rev. Peru. Biol., vol. 7, no. 1, pp. 67–73, Jun. 2000, doi: 10.15381/rpb.v7i1.6729.

[29] C. Ortiz, F. Lazo, C. Bellido, E. Gonzales, and A. Yarlequé, “Variaciones en las actividades enzimáticas del veneno de la serpiente Bothrops atrox "jergón", de tres zonas geográficas del Perú,” Rev. Peru. Med. Exp. Salud Publica, vol. 29, pp. 198–205, 2012, doi: 10.1590/S1726-46342012000200005.

[30] M. Holzer and S. P. Mackessy, “An aqueous endpoint assay of snake venom phospholipase A2,” Toxicon, vol. 34, no. 10, pp. 1149–1155, 1996, doi: 10.1016/0041-0101(96)00057-8.

[31] J. A. Pereañez et al., “Correlation of the inhibitory activity of phospholipase A2 snake venom and the antioxidant activity of Colombian plant extracts,” Brazilian J. Pharmacogn., vol. 20, no. 6, pp. 910–916, Dec. 2010, doi: 10.1590/S0102-695X2010005000030.

[32] C. Pirela, D. Salas, J. Carlos, L. Jim, and L. Hernández, “CARACTERIZACIÓN TOXINOLÓGICA DEL VENENO TOTAL DE LA SERPIENTE DE CASCABEL Crotalus durissus cumanensis ( VIPERIDAE ), PRESENTE EN LA LOCALIDAD DE PORSHOURE , Toxinological Characterization of the Whole Venom of the Rattlesnake Crotalus durissus cumanensis,” vol. XVI, pp. 232–238, 2006.

[33] A. Lourenço et al., “Individual venom profiling of Crotalus durissus terrificus specimens from a geographically limited region: crotamine assessment and captivity evaluation on the biological activities.,” Toxicon, vol. 69, pp. 75–81, Jul. 2013.

[34] J. G. Soto, J. C. Perez, and S. A. Minton, “Proteolytic , hemorrhagic and hemolytic activities of snake venoms,” Toxicon, vol. 26, pp. 875–882, 1988, doi: https://doi.org/10.1016/0041-0101(88)90328-5.

[35] M. C. Dos Santos, L. C. L. Ferreira, W. D. Da Silva, and M. de F. D. Furtado, “Caracterizacion de las actividades biologicas de los venenos ‘amarillo’ y ‘blanco’ de Crotalus durissus ruruima comparados con el veneno de Crotalus durissus terrificus. Poder neutralizante de los antivenenos frente a los venenos de Crotalus durissus ruruima,” Toxicon, vol. 31, no. 11, pp. 1459–1469, Nov. 1993, doi: 10.1016/0041-0101(93)90211-Z.

[36] L. J. Vargas et al., “An acidic phospholipase A2 with antibacterial activity from Porthidium nasutum snake venom,” Comp. Biochem. Physiol. - B Biochem. Mol. Biol., vol. 161, no. 4, pp. 341–347, Apr. 2012, doi: 10.1016/j.cbpb.2011.12.010.

[37] L. J. Vargas, J. C. Quintana, J. A. Pereañez, V. Núñez, L. Sanz, and J. Calvete, “Cloning and characterization of an antibacterial l-amino acid oxidase from Crotalus durissus cumanensis venom,” Toxicon, vol. 64, pp. 1–11, Mar. 2013, doi: 10.1016/J.TOXICON.2012.11.027.

[38] E. S. Yamane et al., “Unraveling the antifungal activity of a South American rattlesnake toxin crotamine,” Biochimie, vol. 95, no. 2, pp. 231–240, Feb. 2013, doi: 10.1016/J.BIOCHI.2012.09.019.

[39] N. Oguiura, M. Boni-Mitake, R. Affonso, and G. Zhang, “In vitro antibacterial and hemolytic activities of crotamine, a small basic myotoxin from rattlesnake Crotalus durissus,” J. Antibiot. (Tokyo)., vol. 64, no. 4, pp. 327–331, Apr. 2011, doi: 10.1038/ja.2011.10.

[40] A. J. Magro, R. J. DA Silva, P. R. R. Ramos, A. L. Cheruboni, and M. R. Hataide, “Intraspecific variation in the venom electrophoretic profile of recently captured Crotalus durissus terrificus (Laurenti, 1768) snakes,” J. Venom. Anim. Toxins, vol. 7, no. 2, pp. 276–301, Dec. 2001, doi: 10.1590/S0104-79302001000200010.

Descargas

La descarga de datos todavía no está disponible.